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施啟樂(lè ) | 倒平板的小技巧

作者:stier ???時(shí)間:2022-01-17 18:17:54

  在生物實(shí)驗中經(jīng)常需要倒平板,初學(xué)者往往倒不好,導致后繼實(shí)驗出現問(wèn)題。今天,小施總結幾點(diǎn)倒平板小技巧供大家參考。

  培養基傾注溫度

  1、培養基傾注適宜溫度約45℃。如果手心接觸裝培養基的三角瓶不燙,手背接觸燙,此時(shí)的溫度在45度左右,最適合倒平板。培養基傾注時(shí)溫度太高的話(huà),凝固時(shí)間較長(cháng),另外皿蓋上會(huì )有大量冷凝水,不利于后續實(shí)驗。溫度太低,則容易出現倒板過(guò)程中瓶中培養基部分凝固的現象。如果要連續倒多個(gè)皿,尤其是在冬天,非常容易凝固,一旦凝固則需要再加熱到較高溫度才能溶化。所以建議此時(shí)開(kāi)個(gè)50度的恒溫水浴,隨時(shí)可把裝培養基的三角瓶放進(jìn)去加熱,效果會(huì )更好。

  2、有些培養基需要加入添加成分,這些添加成分在加入前應先放置到室溫,避免冷的液體造成瓊脂凝結或形成片狀物。

  3、目前多數實(shí)驗室培養基滅菌后會(huì )放置水浴或者烘箱中,需使用的時(shí)候拿出來(lái)直接倒板。但培養基靜置時(shí)間不宜過(guò)長(cháng),靜置時(shí)間一般不超過(guò)4小時(shí)。靜置時(shí)間過(guò)長(cháng),培養基中瓊脂可能會(huì )少量凝固,形成類(lèi)似絮狀析出。

  培養皿中有冷凝水

  培養皿中有冷凝水,如果只有幾滴,則影響不大,如果過(guò)多則需要引起注意。

  1、倒皿前將平皿最好保持在35℃-40℃的溫度(觸手有溫熱感)。

  2、當需要表面接種時(shí),有冷凝水的平板表面容易產(chǎn)生蔓延菌落。這時(shí)可放在有對流的無(wú)菌凈化臺中吹干培養基表面,但不能過(guò)度干燥,否則培養過(guò)程中平板容易開(kāi)裂。

  3、如果是進(jìn)行傾注平板計數,則可在凝固后的瓊脂表面再覆蓋一薄層瓊脂培養基即可。

  平板傾注量

  一般平板傾注量在18-20mL左右,如果培養時(shí)間超過(guò)48小時(shí)或者是培養溫度高于40℃,為防止水分過(guò)量蒸發(fā)導致平板開(kāi)裂,傾注量一般是25mL左右。傾注平皿時(shí)左三圈、右三圈的輕輕晃動(dòng),注意避讓平皿蓋。

  平板氣泡

  倒板過(guò)程中容易出現氣泡,特別是像BS瓊脂這類(lèi)需要搖勻后倒板的培養基。氣泡過(guò)多的話(huà)會(huì )影響結果觀(guān)察,所以在實(shí)驗操作中盡量避免或減少氣泡。

  1、加熱時(shí)培養基融化即可,避免溫度過(guò)高產(chǎn)生氣泡。

  2、倒平板時(shí)盡量貼著(zhù)平皿壁緩慢倒入,將氣泡留在瓶子底部。

  3、如果平板中有少量氣泡的話(huà),可以把氣泡輕搖到平板壁上,這樣不會(huì )影響結果觀(guān)察。

  有實(shí)驗小伙伴說(shuō),倒平板我不怕,但是洗平板真的很絕望??!清洗實(shí)驗器皿,找小施就對咯,這個(gè)小施很在行的!

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